شناسایی موتاسیونهای مرتبط با مقاومت به ایزونیازید در مایکوباکتریوم توبرکلو‌زیس بیماران مسلول با استفاده از روش PCR-RFLP و MAS PCR

چکیده زمینه و هدف: ایزونیازید یکی از داروهای مهم خط اول درمان سل می‌باشد. مقاومت به این دارو در بسیاری از نقاط جهان رو به افزایش است. جهش‌های ایجاد شده در ژنKatG و inhA در اغلب موارد عامل مقاومت به ایزونیازید می‌باشند. هدف از این مطالعه ارائه روشی مناسب و سریع برای شناسایی موتاسیونهای مرتبط با مقاومت به ایزونیازید در مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می‌باشد. روش بررسی: در این مطالعه وجود جهش در نواحی خاصی از ژنهای katG وinhA در90 نمونه کشت مثبت بیماران مسلول ریوی پس از انجام تست‌های حساسیت داروئی بررسی شد. برای تعیین جهش‌های کدون 315 KatG از تکنیکPCR-RFLP استفاده گردید. محصول PCR حاصل از تکثیر این قطعه ژنی (bp620) توسط آنزیم محدودالاثر MspI برش داده شد. برای شناسائی جهش در ژن inhA نیز از تکنیک MAS-PCR استفاده شد. یافته‌ها: 5/34% درصد از نمونه‌های مقاوم به ایزونیازید فنوتیپ Thr315 و 5/65% از نمونه‌های مقاوم فنوتیپ Ser315 را نشان دادند. اختصاصیت Thr315 برای نمونه‌های مقاوم 100% می‌باشد. همچنین در این مطالعه از 52 نمونه مقاوم به ایزونیازید 6/34% در کدون 463 دارای اسیدآمینه Arg و 4/65% دارای اسیدآمینه Leu بودند. فراوانی جهش در لوکوس (15C →T-)inhA نمونه‌های MDR و غیرMDR به ترتیب 20% و 7/16% درصد بود. نتیجه‌گیری: با استفاده از روش PCR-RFLP (آنزیم MSPI) و MAS PCR جهش‌های ایجاد شده در کدون 315 ژن KatG و ناحیه پروموتورinhA شناسایی می‌شوند. این روشها علاوه بر سادگی و ارزان بودن نسبت به روشهای دیگر در مدت زمان کمتری نتایج دقیق و مطمئنی را فراهم می‌آورند. کلید واژه‌ها: مایکوباکتریم توبرکلوزیس، مقاومت به ایزونیازید،PCR-RFLP، KatG،inhA ،MAS PCR وصول مقاله: 9/10/88 اصلاح نهایی: 16/10/88 پذیرش مقاله: 17/11/88